氧化与抗氧化系列_过氧化氢(H2O2)测试盒
氧化与抗氧化系列_过氧化氢(H2O2)测试盒
测定方法:微量法
产品规格:100管/96样
注 意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
H2O2是生物体内常见的活性氧分子,主要由SOD和XOD等催化产生,由CAT和POD等催化降解。H2O2不仅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互转化的枢纽。一方面,H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体;另一方面H2O2也是许多氧化应急反应中的关键调节因子,。
氧化与抗氧化系列_过氧化氢(H2O2)测试盒
测定原理:
H2O2与硫酸钛生成的过氧化钛复合物,在415nm有特征吸收。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、丙酮100mL、浓盐酸5mL、研钵和冰。
试剂的组成和配制:
试剂一:丙酮100mL×1瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入3mL浓盐酸充分溶解备用。用不完的试剂4℃保存;(溶解时间较长,约30min,可40℃-60℃加热,务必提前准备)
试剂三:液体10mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:液体30mL×1瓶,4℃保存;
H2O2提取:
1、细菌或细胞样品的制备:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);用试剂一定容至1mL;8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2. 组织样品的制备:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆;转移至EP管中,用试剂一定容至1mL,8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)样品:直接检测。