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总巯基(-SH)测试盒_氧化与抗氧化系列

  • 更新时间:  2022-07-27
  • 产品型号:  50管/24样
  • 简单描述
  • 总巯基(-SH)测试盒_氧化与抗氧化系列由上海纪宁生物公司提供,包括-SH检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍
详细介绍

总巯基(-SH)测试盒_氧化与抗氧化系列

测定方法:分光光度法

产品规格:50管/24样

注   意 :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

总巯基(-SH)测试盒_氧化与抗氧化系列

测定意义:

生物体内巯基主要包括GSH巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质,而且参与活性氧清除,后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和GSH含量,能够间接测定蛋白质巯基含量。

测定原理:

巯基基团与5,5’- 二硫代-双-硝基苯甲酸(DTNB)反应,生成黄色化合物,在412nm处有最大吸收峰。

自备实验用品:

天平、研钵、可见分光光度计、恒温水浴锅、1mL玻璃比色皿、乙醇和蒸馏水。

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试剂组成和配制:

试剂一:液体40 mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体2 mL×1瓶,4℃避光保存。 

样品的制备:

1.按照组织质量(g):水体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2.血清,培养液:稀释5倍后测定,可取0.1mL样本,加入0.4mL蒸馏水,混匀,置冰上待测。

计算公式:

总巯基标准曲线:y =3.6222 x- 0.0037,R2 = 1,x为标品浓度,单位μmol/mL, y为吸光度ΔA。

1. 组织:

(1)按样本重量计算

总巯基含量(μmol/g 鲜重)=(ΔA+0.0037)÷3.6222 ×V样总÷W

=0.276×(ΔA+0.0037)÷W

(2)按样本蛋白浓度计算

 

总巯基含量(μmol/mg prot)=(ΔA+0.0037)÷3.6222×V样总÷Cpr

=0.276×(ΔA+0.0037)÷Cpr

2. 血清、培养液:

总巯基含量(μmol/L)=(ΔA+0.0037)÷3.6222 ×5×103

=1380×(ΔA+0.0037)

V样总:加入提取液体积,1mL;W:样品质量,g ;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;5:血清,培养液等液体样本稀释倍数;103 :1mmol/L=103μmol/ L



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