葡萄糖氧化酶(GOD)测试盒_氧化与抗氧化系列

测定方法：分光光度法

产品规格：50管/24样

注    意：正式测定前取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

GOD（EC 1.1.3.4）广泛存在于动物、和植物中，催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并产生H2O2，是生物体中产生活性氧的代谢途径之一。

葡萄糖氧化酶(GOD)测试盒_氧化与抗氧化系列

测定原理：

GOD催化产生H2O2，过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基偶联酚，生成有色化合物，在500 nm有特征吸收峰，颜色深浅与GOD活性成线性关系。

试验中所需的仪器和设备：

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水

试剂的组成和配制：

提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；

缓冲液：液体50mL×1瓶，4℃保存；

试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入20mL缓冲液充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存一个月；

试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入20mL缓冲液充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存一个月；

样品测定的准备：

1、细菌、细胞或组织样品的制备：

细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、血清（浆）样品：直接检测。

测定步骤：

1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至500nm，蒸馏水调零。

2、试剂一和试剂二的配制：参见试剂的组成和配制。

3、煮沸样本的准备：取500μL样本至新的EP管中，95℃水浴10min，冷却至室温后，8000g 4℃离心10min，取上清作为对照管的煮沸样本待测。