超氧阴离子OFR测试盒(氧化与抗氧化系列)
超氧阴离子OFR测试盒(氧化与抗氧化系列)
测定方法:分光光度法
产品规格:50管/48样
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用,但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用,导致机体细胞和组织代谢异常,从而引起多种疾病。
超氧阴离子OFR测试盒(氧化与抗氧化系列)
测定原理:
超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-在对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,根据ΔA值可以计算样品中O2-含量,反应式为NH2OH + 2O2- +H+ → NO2- + H2O2 + H2O。
自备实验用品及仪器:
天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、氯仿和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体25mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体20mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体20mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂四:氯仿,自备。
超氧阴离子提取:
1.植物、动物组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃,离心20min,取上清置于冰上待测。。
2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心20min,取上清置于冰上待测。
3.血清或培养液:直接测定。