您好,欢迎进入上海纪宁实业有限公司网站!
一键分享网站到:
您现在的位置:首页 >> 产品中心 >> 生化测试盒 >> 糖酵解系列 >> 50管/48样3磷酸甘油酸激酶PGK测试盒糖酵解系列分光法

3磷酸甘油酸激酶PGK测试盒糖酵解系列分光法

  • 更新时间:  2022-07-26
  • 产品型号:  50管/48样
  • 简单描述
  • 3磷酸甘油酸激酶PGK测试盒糖酵解系列分光法由上海纪宁生物公司提供,包括PGK检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍
详细介绍

3磷酸甘油酸激酶PGK测试盒糖酵解系列分光法

测定方法:分光光度法

产品规格:50管/48样

注   意 :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的关键酶,广泛存在于动植物和微生物体内,催化1,3-二磷酸甘油酸转变为3-磷酸甘油酸,产生1分子ATP,具有影响DNA复制和修补及刺激病毒RNA合成等生物学功能,广泛应用于药物靶标设计。

3磷酸甘油酸激酶PGK测试盒糖酵解系列分光法

测定原理:

3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP产生1,3-二磷酸甘油酸和ADP,1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脱氢酶和NADH作用下产生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸,340nm处的吸光度变化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。

自备实验用品及仪器:

天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿。

637937511256494615458.jpg

试剂组成和配制 :

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体25mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂二:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。临用前加5mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

试剂三:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。临用前加2.5 mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

试剂四:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。临用前加2.5 mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

试剂五:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。临用前加10 mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

酶液提取:

①总PGK酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,500g离心5min,取上清测定。

②胞浆和叶绿体PGK酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液),冰浴匀浆后于4℃,500g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆PGK酶活性,取沉淀加1mL提取液,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,500g离心5min,取上清测定叶绿体中PGK酶活性。

建议测定总PGK酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的PGK,则按照步骤②提取粗酶液。



留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
    QQ在线客服
  •   在线咨询
  • 点击这里给我发消息
电话
021-54845833
手机
13524933993