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乳酸含量(LA)测试盒_糖酵解系列_分光光度法

  • 更新时间:  2022-07-26
  • 产品型号:  50管/24样
  • 简单描述
  • 乳酸含量(LA)测试盒_糖酵解系列_分光光度法由上海纪宁生物公司提供,包括LA检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍
详细介绍

乳酸含量(LA)测试盒_糖酵解系列_分光光度法

测定方法:分光光度法

产品规格:50管/24样

注   意 :正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物,与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量

代谢密切相关,乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。

乳酸含量(LA)测试盒_糖酵解系列_分光光度法

测定原理:

乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸,同时使NAD+还原生成NADH 和H+,H+传递给PMS

生成的 PMSH2 还原 INT 生成红色物质,在 530nm 处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器:

天平、研钵、离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。

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试剂组成和配制:

提取液:液体 55mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存。

试剂二:液体 12mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1 支,-20℃避光保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水充分溶解。

试剂四:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加 15mL 蒸馏水充分溶解。

试剂五:粉剂×1 支,4℃避光保存。标准品:液体 1mL×1 支,4℃保存。

显色液:临用前根据用量按照提取液(V):试剂三(V):试剂四(V):试剂五(m)=1(mL): 0.3(mL):3(mL):15(mg)的比例充分混匀。(注意:现配现用,用多少配多少,在棕色瓶中配制,试剂盒中带有 5 个棕色空瓶)

样本处理:

1.    组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL

提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于 4℃,12000g 离心 10min,取上清测定。

2.    细胞:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1  的比例(建议 500万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);于 4℃,12000g 离心 10min,取上清测定。

3. 血清:直接测定。


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