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果糖-6-磷酸果糖激酶PFK测试盒_糖酵解系列

  • 更新时间:  2022-07-26
  • 产品型号:  50管/48样
  • 简单描述
  • 果糖-6-磷酸果糖激酶PFK测试盒_糖酵解系列由上海纪宁生物公司提供,包括PFK检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍
详细介绍

果糖-6-磷酸果糖激酶PFK测试盒_糖酵解系列

测定方法:分光光度法

产品规格:50管/48样

注   意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

PFK(EC 2.7.1.11)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,负责将果糖-6-磷酸和ATP转化为果糖-1,6二磷酸和ADP,是糖酵解过程的关键调节酶之一。

果糖-6-磷酸果糖激酶PFK测试盒_糖酵解系列

测定原理:

PFK催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映PFK活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

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试剂的组成和配制:

提取液:60mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体40mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存,临用前加入2.8mL蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20度保存,禁止反复冻融;

试剂三:粉剂×1支,4℃保存,临用前加入260μL蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20度保存,禁止反复冻融;

试剂四:液体16μL×1支,4℃保存,临用前加入260μL蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20度保存,禁止反复冻融;

样本的前处理:

1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为1000~5000:1的比例(建议2000万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

3、血清(浆)样品:直接检测。




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