脂肪酸代谢系列_磷脂酶A2(PLA2)测试盒

测定方法：微量法

产品规格：100管/48样

注   意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

磷脂酶A2（EC3.1.1.4）是磷脂sn-2位脂酰基水解酶，广泛存在于动植物组织、细菌、细胞核分泌物中，参与脂肪消化，精子成熟、细胞信号传递、脂质过氧化修复、宿主反应等生理过程，在控制体内磷脂类物质平衡、调节机体新陈代谢、参与疾病的病理进程等方面发挥着及其重要的作用。

脂肪酸代谢系列_磷脂酶A2(PLA2)测试盒

测定原理：

磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸（HEPC）产生游离巯基，与DTNB反应生成黄色物质，在412nm处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器：

天平、超速冷冻离心机、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。

试剂组成和配制：

提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体100mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：液体×5瓶，-20℃避光保存。临用前根据用量每瓶加入1.8mL试剂二充分混匀；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。

样品处理：

1.组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，10000g离心5min，取全部上清于4℃、100000g离心30min，弃上清，取沉淀溶于1mL试剂一。

2.细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后于4℃，10000g离心5min，取全部上清于4℃、100000g离心30min，弃上清，取沉淀溶于1mL试剂一。

3.血清：直接测定。