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脂肪酸代谢系列_(FC)含量测试盒_微量法

  • 更新时间:  2022-07-27
  • 产品型号:  100管/96样
  • 简单描述
  • 脂肪酸代谢系列_(FC)含量测试盒_微量法由上海纪宁生物公司提供,包括FC检测试剂盒说明书,免费代测,规格,包装,品牌等关于有关本司测试盒所有产品的详细介绍
详细介绍

脂肪酸代谢系列_(FC)含量测试盒_微量法

测定方法:微量法

产品规格:100管/96样

注    意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

FC是构成细胞膜的主要成分,也是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸等生理活性物质的重要原料。FC浓度可作为脂代谢的指标。

脂肪酸代谢系列_(FC)含量测试盒_微量法

测定原理:

FC氧化酶催化FC生成△4-胆甾烯酮和H2O2,过氧化物酶催化H2O2、4-氨基和酚生成红色醌类化合物,在500nm有吸收峰,其颜色深浅与FC含量成正比。

自备仪器和用品:

水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96孔板、异丙醇和蒸馏水。

试剂组成和配置:

试剂一:异丙醇100mL(自备);

试剂二:液体20mL×1瓶,4℃保存;

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;

试剂四:液体40μL×1瓶,4℃保存;

TC标准品:液体1mL×1支,0.5μmol/mL,4℃保存。


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FC的提取:

1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。

2.细菌、真菌:先收集400-500万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加1mL试剂一,超声波破碎1min(强度20%,超声2s,停1s),即FC待测液。

3.血清(浆)样品:直接测定。

测定操作:

1. 酶标仪预热30 min,调节波长到500 nm。

2. FC工作液的配制:临用前,吸取约0.8mL试剂二分别加入试剂三和试剂四瓶中,充分溶解后再全部转移回试剂二瓶中,充分混匀,FC工作液置于37℃水浴10min。用不完的工作液4℃保存一周。

3. 标准管:依次在96孔板中加入20μL FC标准液和180μL FC工作液,混匀,37℃静置3h后于500nm测定A标准管。

4. 测定管:依次在96孔板中加入20μL FC待测液和180μL FC工作液,混匀,37℃静置3h后于500nm测定A测定管。

5、空白管:依次在96孔板中加入20μL 试剂一和180μL FC工作液,混匀,37℃静置3h后于500nm测定

A测定管。

注意事项:

1、 标准管和空白管只要做一管。

2、 若测定管产生白色浑浊,可以将待测液用异丙醇稀释2~5倍后测定,并在后结果乘以相应倍数。



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