游离脂肪酸含量(FFA)测试盒_微量法

测定方法：微量法

产品规格：100管/96样

注    意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

游离脂肪酸，也称为非酯化脂肪酸，在与白蛋白结合的血浆中循环。动物血液中的游离脂肪酸 (FFA )含量是一项重要的生理生化指标。血清中游离脂肪酸的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关，游离脂肪酸的浓度会因为糖尿病、重症肝障碍、甲状腺功能亢进等疾病而上升。

游离脂肪酸含量(FFA)测试盒_微量法

测定原理：

用有机溶剂萃取FFA。含有FFA的有机液与三乙醇胺铜反应,在有机相中形成脂肪酸铜 (铜皂) FFA一Cu。Cu离子与显色液反应形成紫红色络合物。反应形成的颜色深浅与Cu离子浓度的关系符合朗伯一比尔定律，因此可利用此反应进行比色。

自备的仪器和用品：

酶标仪、离心机、可调式移液器、96孔板、蒸馏水。

试剂的组成和配制：

萃取液：液体 120 mL×1瓶，4℃保存；

试剂一：液体 15 mL×1瓶，4℃保存；

试剂二：液体 15 mL×1瓶，4℃保存；

试剂三：粉剂×1瓶，室温保存；

试剂四：液体 12 mL×1瓶，4℃保存；

样本前处理：

1.动物组织：按照动物组织质量（g）：萃取液mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL萃取液），进行冰浴匀浆。震荡提取15min，5000 rpm 4℃离心5min，取有机相待测。

2.血清：吸取50 μL血清样本，加入1 mL萃取液，震荡提取15 min后，4℃，5000 rpm离心5 min，取有机相待测。

3.微生物、细胞：按照细胞数量（104个）：萃取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1 mL萃取液）加入萃取液，冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声2秒，间隔3秒，总时间3min）；震荡提取15 min，然后5000 rpm 4℃离心5min，取有机相待测。

注意：有机相待测液可能存在于上层，也可能存在于下层，注意观察，体积较多的那一层即为有机相待测液。