CoA羧化酶ACC测试盒_脂肪酸代谢系列_分光法

测定方法：分光光度法

产品规格：50管/24样

注    意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

ACC在生物体内催化乙酰CoA羧化生成丙二酰CoA，是脂肪酸和许多次生代谢产物合成的关键酶。ACC的活性在一定程度上决定了脂肪酸的合成速度和含油量的高低。

CoA羧化酶ACC测试盒_脂肪酸代谢系列_分光法法

测定原理：

ACC能够催化乙酰CoAA、NaHCO3和ATP生成丙二酰CoA、ATP和无机磷，通过钼酸铵定磷法测定无机磷的增加量来测定ACC活性。

需自备的仪器和用品：

分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成：

提取液：60mL×1瓶，4℃保存；

试剂一：20mL×1瓶， 4℃保存；

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；

试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存；

试剂四：粉剂×1 瓶, 4℃保存。用时加入25mL蒸馏水，溶解后4℃可保存一周。

试剂五：粉剂×1瓶, 4℃保存。用时加入25mL蒸馏水，溶解后4℃可保存一周。

试剂六：液体 25mL×1 瓶，室温保存。

试剂七：10μmol/mL 标准磷贮备液 10mL×1 瓶，4℃保存。

样本的前处理：

1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。